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MTT

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  • 产品说明
  • 一、亚博体育官方在线原理

    MTT比色法是检测细胞存活与生长的一种亚博体育app官方下载苹果方法,广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。其检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为不溶于水的蓝色甲瓒并沉积在细胞汇总,而死细胞无此作用。在特定统计DMSO存在的情况下,不溶的甲瓒沉积物被完全溶解。然后通过酶标仪检测570nm波长处的吸光值。细胞增殖越多越快,则吸光值越高;细胞毒性越大,则吸光值越低。

    二、MTT细胞亚博体育官方在线步骤

    1细胞种板将对数生长期细胞用胰蛋白酶消化,配制成细胞悬液,按3000-5000细胞每孔接种于96孔板,每孔加100μl,置于CO2(5%)培养箱中37℃下培养过夜贴壁,边缘孔用无菌PBS填充。

    2按亚博体育官方在线方案进行加药处理,每个样本浓度设3~5个重复。

    3MTT反应所有孔中分别加入20μl MTT溶液5mg/ml,即0.5%MTT,培养箱中孵育4小时。

    4DMSO溶解甲臜小心的吸除上清液,每孔加DMSO(二甲基亚砜)150μl,在摇床低速(120~140rpm/min)震荡10min使结晶物充分溶解。

    5测吸光度值使用酶标仪测定490nm光吸收值,按公式计算药物对细胞的抑制率。

    三、结果分析

    亚博体育官方在线组:亚博体育官方在线组细胞DMSO溶解的吸光度值

    阴性对照:对照组细胞DMSO溶解的吸光度值

    空白对照:DMSO溶液的吸光度值

    增殖率= (亚博体育官方在线组-空白对照)/(阴性对照-空白对照)×100

    抑制率= 1-(亚博体育官方在线组- 空白对照)/(阴性对照-空白对照)×100


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