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免疫荧光(单标)/IF

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  • 产品说明
  • 一、亚博体育官方在线器材及亚博体育ios官方下载

    1、 亚博体育官方在线器材

    名称

    厂家

    型号

    脱水机

    武汉俊杰电子有限公司

    JJ-12J

    包埋机

    武汉俊杰电子有限公司

    JB-P5

    病理切片机

    上海徕卡仪器有限公司

    RM2016

    冻台

    武汉俊杰电子有限公司

    JB-L5

    组织摊片机

    浙江省金华市科迪仪器设备有限公司

    KD-P

    烤箱

    上海福玛亚博体育官方在线仪器有限公司

    DGX-9003B

    载玻片及盖玻片

    江苏世泰亚博体育官方在线器材有限公司

    10212432C

    微波炉

    格兰仕微波炉电器有限公司

    P70D20TL-P4

    脱色摇床

    北京市六一仪器厂

    WD-9405A

    涡旋混合器

    天悦电子

    TYXH-II

    移液枪

    Dragon

    KE0003087/KA0056573

    组化笔

    Gene tech

    GT1001

    倒置荧光显微镜

    日本尼康

    Nikon Eclipse Ti-SR

    成像系统

    日本尼康

    Nikon DS-U3

    2、 主要亚博体育官方在线亚博体育ios官方下载

    亚博体育ios官方下载

    厂家

    货号

    无水乙醇、二甲苯

    国药集团化学亚博体育ios官方下载有限公司


    EDTAPH8.0)抗原修复液

    谷歌生物


    EDTA(PH9.0)抗原修复液

    谷歌生物

    G1203

    柠檬酸(PH6.0)抗原修复液

    谷歌生物

    G1202

    PBS缓冲液

    谷歌生物

    G0002

    BSA

    solarbio

    A8020

    荧光二抗FITCCY3

    谷歌生物


    DAPI

    谷歌生物

    G1012

    抗荧光淬灭封片剂

    谷歌生物

    G1401

    二、 石蜡切片免疫荧光亚博体育官方在线步骤

    1、 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯15min-二甲苯15min-无水乙醇5min-无水乙醇5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。

    2、 抗原修复:组织切片置于盛满EDTA抗原修复缓冲液PH9.0的修复盒中于微波炉内进行抗原修复。中火至沸后断电间隔10min中低火至沸,此过程中应防止缓冲液过度蒸发,切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min(修复液和修复条件根据组织来确定)

    3、 加一抗:轻轻甩掉封闭液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)

    4、 加二抗:玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织,避光室温孵育50min

    5、 DAPI复染细胞核:玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加DAPI染液,避光室温孵育10min

    6、 封片:玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。

    7、 镜检拍照:切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。


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