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Tunel(荧光)检测

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  • 产品说明
  • 一、亚博体育官方在线器材及亚博体育ios官方下载

    1、 亚博体育官方在线器材

    名称

    厂家

    型号

    脱水机

    武汉俊杰电子有限公司

    JJ-12J

    包埋机

    武汉俊杰电子有限公司

    JB-P5

    病理切片机

    上海徕卡仪器有限公司

    RM2016

    冻台

    武汉俊杰电子有限公司

    JB-L5

    组织摊片机

    浙江省金华市科迪仪器设备有限公司

    KD-P

    烤箱

    上海福玛亚博体育官方在线仪器有限公司

    DGX-9003B

    载玻片及盖玻片

    江苏世泰亚博体育官方在线器材有限公司

    10212432C

    水浴锅

    天力医疗器械有限公司

    TL-420D

    脱色摇床

    北京市六一仪器厂

    WD-9405A

    涡旋混合器

    天悦电子

    TYXH-II

    移液枪

    Dragon

    KE0003087/KA0056573

    组化笔

    Gene tech

    GT1001

    倒置荧光显微镜

    日本尼康

    Nikon Eclipse Ti-SR

    成像系统

    日本尼康

    Nikon DS-U3

    2、 主要亚博体育官方在线亚博体育ios官方下载

    亚博体育ios官方下载

    厂家

    货号

    无水乙醇、二甲苯

    国药集团化学亚博体育ios官方下载有限公司


    PBS缓冲液

    谷歌生物

    G0002

    蛋白酶K

    Roche


    破膜液

    谷歌生物

    G1204

    DAPI

    谷歌生物

    G1012

    抗荧光淬灭封片剂

    谷歌生物

    G1401

    盐酸、氨水、双氧水

    国药集团化学亚博体育ios官方下载有限公司


    Tunel亚博体育ios官方下载盒

    Roche

    11684817910

    二、 石蜡切片tunel亚博体育官方在线步骤

    1、 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯15min-二甲苯15min-无水乙醇5min-无水乙醇5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。

    2、 修复:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止液体流走),在圈内滴加蛋白酶K工作液覆盖组织37度温箱孵育30min将玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min

    3、 破膜:切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织,常温下孵育20min将玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min

    4、 加亚博体育ios官方下载1,2:按片子数量和组织大小取tunel亚博体育ios官方下载盒内适量亚博体育ios官方下载1 (TdT) 和亚博体育ios官方下载2(dUTP)2:29混合,加到圈内覆盖组织切片平放于湿盒内,37水浴锅孵育2小时,湿盒内加少量水保持湿度。

    5、 DAPI复染细胞核:PBSPH7.4洗涤3次,每次5min去除PBS后在圈内滴   DAPI染液,避光室温孵育10min

    6、封片:玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。

    7、 镜检拍照:切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。


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